Los hongos (hongos) se encuentran ampliamente en la naturaleza. Aunque hasta la fecha se han descrito aproximadamente 400.000 especies, sólo entre 100 y 150 de ellas pueden causar infección en humanos. Las enfermedades causadas por hongos se llaman micosis. La rama de la ciencia que estudia los hongos y las enfermedades fúngicas se llama micología.
Los hongos son microorganismos con estructura eucariota. Al no contener clorofila, no pueden realizar la fotosíntesis y se diferencian de las plantas por esta característica. Son anaerobios facultativos o aerobios obligados. Los hongos son microorganismos heterófilos, lo que significa que utilizan compuestos orgánicos como fuente de carbono y energía. Digieren los alimentos liberando enzimas hidrolíticas al ambiente externo y llevan los nutrientes digeridos a las células mediante absorción.
Algunos hongos tienen cápsulas y una estructura de polisacárido. El polisacárido cápsula consta de al menos tres polímeros diferentes: glucuronoxilomanano, galactoxilomanano y manoproteína. En los hongos, el 90% de la pared celular está formada por polímeros de polisacáridos como quitina, glucano, manano y quitosano, y el 10% está formado por proteínas, glicoproteínas y lípidos. El tipo y la cantidad de polisacáridos varía según la especie de hongo. La pared celular da forma a la célula, la protege del shock osmótico, es antigénica y tiene actividad fisiológica porque contiene algunas enzimas. La membrana celular es una estructura bicapa compuesta de fosfolípidos, proteínas y esteroles, similar a las membranas de los mamíferos. A diferencia de la membrana de los mamíferos, contiene ergosterol y zimosterol en lugar de colesterol. Las funciones de la membrana celular incluyen proteger el citoplasma, regular el intercambio de sustancias y ayudar a la síntesis de cápsulas y paredes. El sitio objetivo de la mayoría de los fármacos del grupo de los antifúngicos que se utilizan hoy en día con fines terapéuticos es el ergosterol, ubicado en la membrana.
Las esporas de los hongos son responsables de la reproducción. La reproducción se produce a través de esporas sexuales (zigospora, ascospora, basidiospora), esporas asexuales (blastospora, artrospora, clamidospora, macroconidio, microconidio, esporangiospora) o de forma parasexual. La clasificación científica de los hongos se basa en las esporas sexuales. Según su aspecto morfológico; Se divide en dos: levaduras (Candida, Saccharomyces, etc.) y mohos (Ascomycetes, Zygomycetes, Deuteromycetes, etc.).
Pruebas de diagnóstico
El aislamiento y la identificación de una amplia variedad de hongos se realizan mediante la aplicación de métodos basados y no basados en cultivo (serológicos, moleculares). Antes de iniciar el tratamiento antifúngico, las muestras clínicas deben recolectarse en condiciones asépticas, no colocadas en formalina, y entregadas al laboratorio en recipientes estériles con el medio portador más adecuado para el material.
Debido al largo tiempo de espera Para obtener resultados de cultivo, la evaluación microscópica directa es de gran importancia. Las muestras clínicas enviadas al laboratorio se evalúan primero macroscópicamente, y en la evaluación microscópica se obtiene información inicial sobre la presencia de levaduras o mohos. En el examen microscópico directo, se utiliza KOH en una proporción del 10-20-30%, generalmente 30%. Raspados de piel y uñas, plumas, pelos, lana, trozos de piel, etc. Se agrega KOH a los materiales recolectados para disolver la capa de quitina y revelar las hifas del hongo. Para el examen microscópico teñido se utilizan colorantes como tinción de Gram, azul de algodón con lactofenol, blanco de calcoflúor, tinta china, plateado de matamina de Grocott-Gomori, ácido piródico-Schiff (PAS), Giemsa, Wright y Mason-Fontana. La luz de la madera también se puede utilizar para buscar hongos en superficies infectadas. Es un rayo ultravioleta A que pasa a través de un filtro de óxido de níquel. Bajo esta luz, algunos hongos se pueden identificar dando colores como amarillo pálido, verde, fluorescencia amarilla y fluorescencia rojo coral.
El cultivo es un método de diagnóstico más específico que el directo. microscopía. Se aplica cuando no se puede realizar un diagnóstico definitivo o determinar el tipo de hongos. En la evaluación de cultivos, la prioridad es la morfología de las colonias y el color del pigmento resultante. Los medios utilizados varían dependiendo de la muestra clínica tomada. Los medios de cultivo se dividen en propósitos de aislamiento primario y propósitos específicos.
Fines de aislamiento primario;
- Sabauraud-dextrosa-agar (SDA) e infusión cerebro corazón agar (BHI); Se utiliza para el aislamiento primario de hongos saprofitos y patógenos. Para muestras tomadas de ambientes no estériles se utilizan SDA y BHI con antibióticos. Se reproducen en 1 a 4 semanas a temperatura ambiente y 37 °C y forman colonias que generalmente son de color blanquecino o crema, tienen una consistencia suave y suelen tener olor a levadura y olor.
-Agar inhibidor de moho y Fosfato de extracto de levadura. agar de caballo; Aislamiento primario de hongos patógenos.
Fines específicos;
-Jalea de harina de maíz con Tween 80 y azul tripán (MUJ); Diagnóstico por clamidosporas de Candida albicans,
-Agar de transformación de semillas de algodón; Transformación de Blastomyces dermatitidis de fase de moho a fase de levadura,
-Agar de Czapek; Aislamiento de Aspergillus,
Agar alpiste (agar Staib); Aislamiento de Cryptococcus neoformas,
-CHROMagar Candida; Aislamiento de especies de Candida basado en la formación de reacciones enzimáticas,
-Caldo de fermentación de levadura; Propiedades fermentativas de las levaduras,
-Agar nitrógeno de levadura; Propiedades de asimilación de carbohidratos de las levaduras.
Además, los métodos BACTEC y BacT/Alert aceleran la detección de hongos en hemocultivos.
Prueba en tubo de germen; En esta prueba se busca la formación de tubos germinales a partir de células. Se prepara una suspensión ligera de microorganismos similares a las levaduras en 0,5 a 1,0 ml de suero estéril y se incuba a 37°C durante 2 a 4 horas. Se coloca una gota de la mezcla sobre el portaobjetos y se cubre con un cubreobjetos. Se investiga bajo el microscopio si a partir de las células se ha formado el tubo germinal. Esta situación es característica de C. albicans.
Las pruebas para detectar antígenos o metabolitos fúngicos en suero o fluidos corporales son más valiosas para el diagnóstico serológico de infecciones fúngicas sistémicas. Los anticuerpos se pueden detectar mediante métodos de aglutinación de látex (LA), ELISA, inmunoensayo enzimático (EIA), radioinmunoensayo (RIA), inmunoelectroforesis (IE) y inmunodifusión (ID). Con estos métodos se pueden detectar antígenos en la estructura celular o metabolitos; Se pueden detectar manano, D-arabinitol, (1-3)-β-glucano, polisacárido glucoroxilomanano, galactomanano y enolasa.
Aunque los métodos de diagnóstico molecular son cada vez más populares, su aplicación como método de rutina en cada clínica laboratorio se debe a razones económicas y no es común por falta de estandarización. Los métodos de amplificación de señales que utilizan sondas de hibridación y amplificación de ácidos nucleicos se utilizan para detectar e identificar hongos infecciosos. Las tecnologías de amplificación de ácidos nucleicos utilizan la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) o métodos similares. La carga fúngica es muy baja y aún no se dispone de cultivo ni de diagnóstico serológico. Se puede decir que los métodos de diagnóstico basados en PCR serán mucho más eficaces en la fase insuficiente. La PCR con transcriptasa inversa (RT) tiene como objetivo amplificar el ARN diana.
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